瑞孚迪均相检测试剂：基于JAK-STAT通路的自免药物高通量筛选解决方案

自身免疫性疾病（Autoimmune Diseases）是一类因免疫系统功能紊乱导致的慢性炎症性疾病，其特征是免疫系统错误地将自身正常组织识别为外来抗原并发起攻击。据统计，这类疾病影响着全球5%-10%的人口，可导致多器官组织损伤和功能障碍。

JAK-STAT信号通路：

靶向治疗的“黄金赛道”

JAK-STAT信号通路作为细胞因子介导免疫调节的核心通路，其异常激活与多种自身免疫性疾病（AID）的发生发展密切相关。目前针对该通路的靶向治疗策略主要从三个层面展开：

图1. Autoimmunity Reviews;Volume 18, Issue 11, November 2019, 102390

1. 细胞因子受体（上游信号接收）

细胞因子受体多为单次跨膜蛋白，其本身不具有激酶活性，需依赖JAK激酶进行信号转导。通过阻断细胞因子与受体的结合，可以从源头上抑制JAK-STAT通路的激活。

该靶点药物以抗体类药物为主，如广泛应用于类风湿关节炎等疾病的TNF-α抑制剂（阿达木单抗）。

2. JAK激酶（信号转导枢纽）

JAK家族包括JAK1、JAK2、JAK3和TYK4四个成员。当受体二聚化后，JAK激酶会发生相互磷酸化并激活，进而磷酸化下游STAT蛋白。

目前靶向JAK激酶的小分子药物发展迅速，其中第二代高选择性抑制剂（如乌帕替尼）通过精准靶向JAK1亚型，显著降低了药物毒性。

3. STAT蛋白（转录调控执行者）

STAT蛋白家族包含STAT1-6七个成员，其激活过程为：被JAK磷酸化→形成二聚体→核转位→结合DNA调控基因表达。

针对STAT蛋白的药物类型丰富，既包括小分子STAT抑制剂（如Stattic），也包含PROTAC降解剂（如SD-36）等新型药物。

Revvity解决方案：从靶点验证到高效筛选

Revvity的HTRF和Alpha技术平台为自身免疫药物研发提供了一套完整的检测解决方案，覆盖从细胞因子-受体结合、JAK激酶活性检测到STAT蛋白转录调控的全流程研究。该平台凭借以下突出技术优势，已成为药物早期研发阶段进行高通量筛选和靶点验证的关键工具：
1）采用免洗涤的均相检测体系，操作简便高效；
2）具备飞摩尔级的超高检测灵敏度；
3）支持高通量筛选（HTS）需求；

4）为JAK-STAT等关键信号通路的机制研究提供精准数据支持。

1. 靶向表面受体检测

以IL-6/IL-6R结合检测为例：采用竞争法检测体系，可直观反映抑制剂对受体结合的阻断效果。

图2. HTRF Human IL-6/IL-6R Binding检测原理图

2. 抑制JAK激酶

如图所示，所有HTRF KinEASE检测都以相同的方式工作。

激酶反应：将激酶与试剂盒提供的通用底物及ATP在化合物（存在或不存在）条件下孵育。

检测步骤：加入Eu³⁺和XL665偶联物，检测缓冲液中的EDTA可终止酶促反应。

图3. HTRF Kinase Assay检测原理图

3. 调控STAT蛋白

• 检测胞内STAT蛋白的磷酸化水平，评估JAK-STAT信号通路的激活情况。

图4. HTRF磷酸化蛋白水平检测原理图

• 检测胞内STAT蛋白的水平，验证靶向降解药物（如PROTAC）的效果。

图5. Alpha总蛋白水平检测原理图

结语：未来趋势与挑战

随着对JAK-STAT信号通路研究的深入，自身免疫性疾病的治疗正迈向更精准、更高效的靶向时代。JAK抑制剂等小分子药物的成功，不仅验证了该通路的治疗潜力，也为其他免疫相关疾病的药物研发提供了新思路。

在这一进程中，Revvity的高通量筛选与精准检测能力，将持续加速靶点验证与药物优化，推动更多突破性疗法从实验室走向临床。未来，多学科交叉融合、基础研究与临床转化的紧密协作，将进一步提升自身免疫性疾病的诊疗水平，为全球患者带来更长效、更安全的治疗选择。

产品列表

细胞因子/细胞因子受体

激酶试剂盒

STAT家族

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