JCO | 双靶点CAR-T细胞疗法为复发难治套细胞淋巴瘤患者带来新希望

来源：布鲁克细胞分析

作者：Jason xu

套细胞淋巴瘤（Mantle Cell Lymphoma，MCL）是一种侵袭性B细胞恶性肿瘤，传统治疗方法对复发难治（R/R）患者效果有限。近日，一项发表在Journal of Clinical Oncology （IF=41.2）上的研究显示，一种新型双靶点CAR-T细胞疗法（LV20.19）在R/R MCL患者中取得了显著疗效，总体缓解率高达100%，且安全性良好。这一突破性进展为患者带来了新的治疗选择。基于Beacon®单细胞光导平台的CAR-T细胞功能表征分析，也确认了CD19与CD20的双靶点CAR-T在杀伤效果上优于CD19单靶点的CAR-T细胞

研究背景

MCL患者常伴有高风险特征（如TP53突变、复杂细胞遗传学等），现有CD19单靶点CAR-T疗法虽有一定效果，但仍面临毒性高、缓解率不足等问题。研究团队提出假设：同时靶向CD19和CD20的双特异性CAR-T细胞可能通过增强抗肿瘤活性改善疗效。

研究方法

这项I/II期临床试验（NCT04186520）纳入17例R/R MCL患者，采用新型LV20.19 CAR-T细胞疗法，特点包括：

• 双靶点设计：同时靶向CD19和CD20，覆盖更广的肿瘤细胞。
• 优化制造工艺：使用IL-7/IL-15替代IL-2，缩短培养时间至8-12天，提升T细胞的“干性”和持久性。
• 个体化治疗：根据患者情况调整制造流程，缩短“从采血到回输”时间。

临床结果

疗效显著

总体缓解率（ORR）100%，完全缓解率（CR）达88%。

中位随访15.8个月时，仅2例患者复发，中位无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）均未达到。

90天时，86%的患者达到完全缓解，远超预设目标（50%）。

图1：临床结果。

安全性优异

94%的患者出现1-2级细胞因子释放综合征（CRS），无3级以上CRS。

仅18%的患者出现神经毒性（ICANS），且通过鞘内治疗有效控制。

无治疗相关死亡病例。

图2：安全性数据。

创新亮点

01双靶点协同作用

虽然目前有多种针对 MCL 的 CD19 靶向 CAR - T 细胞产品，但它们都受到毒性问题和持久疗效的限制。CD20 是 MCL 中已被证实的可改善生存的靶点，无论是单克隆抗体还是双特异性抗体都显示出疗效，因此增加 CD20 靶向可以减少抗原逃逸，这可能是本研究取得优异结果的原因之一。

研究人员借助 Beacon®单细胞光导平台，对 CAR-T 进行多参数功能表征（包括三种细胞因子分泌和靶细胞杀伤动态监测），以便在单细胞水平对比 LV19 和 LV20.19 CAR-T 细胞。结果显示，在不同受试者中，这两种 CAR-T 细胞对表达抗原的靶细胞杀伤作用均强于不表达抗原的细胞；而且表达抗原的靶细胞能诱导CAR-T细胞分泌多种细胞因子，而对照组细胞难以诱导细胞因子分泌。在受试者 7 和 19 中，LV20.19 CAR-T 细胞对靶细胞的毒性更高，且快速杀伤（少于 8 小时）和中等速度杀伤（9 - 16 小时）的比例，相比 LV19 CAR-T 细胞也是更高。Beacon®平台的“高精度”CAR-T功能表征数据，证明LV20.19 CAR-T细胞比单靶点CD19 CAR-T细胞具有更强的杀伤速度和效果。

图3：CAR20.19 与 CAR19 的单细胞功能分析。

02现场适应性制备流程

通过采用 8 至 12 天的现场适应性制备流程，研究人员能够根据每位患者的具体情况优化 CAR-T细胞产品的制备时长。通过现场制备，大多数患者（60%）在单采后 8 天内就能接受 “新鲜” 的 LV20.19 CAR-T 细胞输注，这缩短了从采集到输注的时间间隔，避免了不必要的桥接治疗。这是本研究的另一个亮点。

研究人员采用IL-7/15扩增工艺，缩短了CAR-T细胞产品的制备时间。为了评估IL-7/15扩增工艺对细胞产品质量的影响，研究人员使用IsoLight功能蛋白质组学研究平台比较了两种不同工艺（IL-7/15 vs IL2）制备的CAR-T的细胞因子分泌。结果显示，在使用IL-7/15制备的CAR-T细胞中，CD4 和 CD8 T细胞亚群的多功能指数（Polyfunctional Strength Index，PSI）均得到了显著改善，这在很大程度上是由效应细胞因子和趋化性细胞因子的增加所驱动的。同样，CD4+ T细胞中多功能细胞的比例也显著提高（p = 0.018），这主要是由产生 5 种或更多细胞因子的多功能细胞所驱动的。基于IsoLight平台的多重细胞因子检测，为CAR-T细胞工艺的评估与选择提供了全面有力的支持。

图4：对采用IL-7/15与IL-2制备的产品进行的单细胞细胞因子分析。

结语

LV20.19 CAR-T细胞疗法的成功，标志着R/R MCL治疗迈入新阶段。其高效、安全的特性为患者带来了治愈的希望，也为CAR-T技术的优化提供了新方向。

本研究中采用了Bruker公司的两大单细胞功能表征平台：Beacon®单细胞光导平台和IsoLight单细胞功能蛋白质组学平台，为CAR-T细胞治疗产品的功效验证和生产工艺确认提供有力的数据支撑。Beacon®平台能够从多个维度评估单个T细胞的功能，包括细胞因子分泌、细胞表面标志物以及靶细胞动态杀伤，是CAR/TCR筛选和功能验证的强大工具。IsoLight单细胞功能蛋白质组学平台可以在单细胞水平同时检测至多32种细胞因子，从而深刻认识免疫细胞的功能，利用创新的多功能指数PSI可以综合地比较不同处理条件下免疫细胞的功效。

图5：Beacon®单细胞光导平台

图6：IsoLight单细胞功能蛋白质组学平台