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Simoa®Homebrew课堂系列 ⑧ | 感染应用 | 检测活动性结核病患者尿液中激动剂和拮抗剂IP-10

时间:2025-04-09 来源:上海玮驰仪器有限公司 阅读:111

来源:simoa单分子技术

背景

每年有超过1000万例结核病(TB)病例和170万例死亡,仍然是全球卫生重点。结核病诊断的金标准是在生物样品中分离出结核分枝杆菌; 然而,培养很耗时,并且不能满足快速正确开始治疗的需要,在肺外结核病中并不总是可行的,并且很难在资源有限的环境中进行。此外,为了预测抗结核治疗的疗效,特异性治疗 2 个月后的痰液转化被广泛用于培养阳性结核病病例,尽管更简单、更快速的诊断检测会很有用。因此,确定用于结核病诊断和治疗监测的新生物标志物将为战胜结核病提供有力的工具。干扰素诱导蛋白10(IP-10 或CXCL10)已被提议作为TB的生物标志物。尿液是一种易于处理且管理风险低的生物样本。因此,本研究的目的是评估是否可以在尿液中检测到IP-10,如果可测量,是否可以将它们用作生物标志物来评估活动性结核病在诊断时和治疗后的免疫反应。

方法

筛选和使用特异性识别CXCL10的激动剂(1-77aa)/拮抗剂(3-77aa) NH2末端的抗体来区分长和短IP-10(图1)。通过SIMOA数字ELISA测量基线和治疗后活动性TB患者尿液中的总IP-10包括激动剂(1-77aa)/拮抗剂(3-77aa)形式。健康供体(HD)和肺炎患者作为对照。

 

图1. Short IP10抗体特异性LSRTRVR序列(左),long IP10抗体特异性识别VPLSRTVR序列(右)

 

图2. 可在尿液中检测到总IP-10、激动剂(长IP-10)和拮抗剂形式(短IP-10)

结果

与健康对照相比,尿液中活动性结核病患者基线时各种形式的IP-10(总IP-10)水平显着升高(p<0.0001),但与肺炎患者检测到的水平相比没有差别。SIMOA 测定使我们能够区分长活性IP-10和短拮抗剂形式(在N末端裂解的2个氨基酸)。因此,利用SIMOA,我们发现与对照相比,活动性结核病和肺炎患者的长IP-10水平显着升高。

结论

我们首次表明激动剂/拮抗剂IP-10形式可以在尿液中测量。IP-10水平升高与结核病和肺炎疾病有关,表明IP-10与急性炎症有关,可作为监测结核病治疗效果的工具的作用。

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