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细胞和微生物培养
咱们从细胞培养支原体污染的来源说起
连续培养细胞污染的概率大约15~35%,生物制药中支原体污染的比例较低,近十年污染百分比在个位数[1]。细胞培养中捣乱的支原体通常是那一小撮,约20多种。其中包括口腔支原体(M.orale)、肺炎支原体(M. pneumoniae)、发酵支原体(M. fermentans)、精氨酸支原体(M. arginini)、莱氏无胆甾原体(A. laidlawii)和猪鼻支原体(M. hyorhinis),占污染比例的95%[2],分别为人源、牛源和猪源支原体。
支原体是怎样被引入到细胞培养中的呢
大家回忆一下细胞培养过程看看……
人员操作、被污染的细胞、原辅料(血清、胰酶、培养基),实验环境污染(生物安全柜、细胞间,培养箱)、实验仪器(水浴锅、液氮罐)、实验耗材(培养皿、方瓶、细胞工厂)都可能是污染源,但是人源的污染概率大,数据表明80.6%的实验人员为支原体携带者。
要想细胞养得好,除了充分的营养,以下10件事情不要忘[3]!
为了养好细胞,操碎了心,不要因为支原体污染,伤透了心。
从来源切断污染,操作过程注意注意再注意,培养中进行定期检测,从此污染是路人!
以上Tips,可参考MycoAlert™产品特点并进行选用。
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相关文献:
[1] 赵翔, 冯建平, 孟淑芳.,2018. 支原体检查的核酸检测方法及方法学验证的思考. 中国药事, 32 (7):1020-1027.
[2] Drexler HG and Uphoff CC., 2002. Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention Cytotechnol 39: 23-38.
[3] Top 10 tips for Mycoplasma free cell http://culture.www.lonza.com/mycoplasma
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