文献解读｜Revvity LabChip微流控毛细管电泳检测mRNA纯度及完整性的应用

背景信息

近年来，基于核酸的技术包括mRNA和质粒DNA被广泛地用于遗传疾病的治疗、癌症预防，以及疫苗等研究中。与传统的灭活或减毒活疫苗相比，mRNA疫苗的生产速度相对更快、成本效益更高，而更快的疫苗开发需要一种高效和快速的检测方法来监测mRNA的纯度和完整性。默沙东公司利用LabCh

ip微流控毛细管电泳来检测mRNA纯度及完整性。

LabChip GXII 系统是Revvity公司（原Perkin Elmer）的，该自动化系统使用“芯片上的实验室”技术进行电泳。在LabChip上，将含有蓝色荧光染料的凝胶筛分基质应用于分离通道，然后对样品进行电动注射，使mRNA与荧光染料结合。施加电压，mRNA通过凝胶基质迁移，按大小进行分离，通过荧光检测观察mRNA信号。每个样本的分离时间为70秒，覆盖50-6000 nt的RNA大小，数据可以在Waters Empower 3软件进行分析。

结果展示

作者在分析开发中主要对样品制备进行了优化，样品处理是通过加入高浓度甲酰胺（>80% v/v），在70°C加热10 min，以确保mRNA完全变性。LabChip GXII仪器和试剂盒由Revvity公司提供，并评估标准分析参数，包括特异性、线性度、准确性、精密度、LOD和LOQ。该技术成功用于监测不同温度下LNPs中mRNA的稳定性，目前已用于工艺方法开发。

表1 mRNA完整性分析

总结

本文基于芯片的微流控毛细管电泳系统LabChip，用于评估mRNA疫苗样本中mRNA的纯度和完整性。芯片可重复利用；每个样品的运行是70s，时间较短，运行96孔板大约2.5小时；并能够进行高通量的样品分析。