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一文了解|酶标仪PMT的两种工作模式Analog与Counts,到底有啥区别?

时间:2025-10-22 来源:上海玮驰仪器有限公司 阅读:20

来源:瑞孚迪生命科学

作者:老刘有点忙

常规酶标仪检测器PMT(光电倍增管)有两种检测模式:Analog和Counts,而且它们的单位也不同,前者常用RFU(相对荧光单位)或RLU(相对发光单位),后者则是counts(计数)或CPS(每秒计数)。在酶标仪使用过程中,经常会有小伙伴问:为啥不同设备信号值差别很大,这到底是怎么回事?别急,今天就带大家用通俗易懂的方式,揭开这两种模式的神秘面纱!

先来认识一下酶标仪的“核心侦探”:PMT

想象一下,你在一个黑暗的房间里,想看看远处微弱的星光。这时,你需要一个超级灵敏的“眼睛”——光电倍增管(PMT)就是这样的角色。它是酶标仪检测器的核心部件,负责捕捉样本发出的光信号(比如荧光或化学发光),并将其放大成我们可以测量的电信号。

图1. 光电倍增管(PMT)

PMT的工作原理有点像“多米诺骨牌”:当光子击中PMT的阴极时,会激发出电子;这些电子经过多级倍增极的放大,最终形成一个可检测的电信号。简单说,PMT能把微弱的光信号“放大”几百万甚至上亿倍,让我们能精确测量样本的浓度或活性。

图2. PMT放大光子的过程

但PMT不是一成不变的,它有两种工作模式:Analog(模拟模式)和Counts(计数模式)。这就像你用手机拍照,可以选择“自动模式”快速捕捉画面,也可以用“专业模式”精细调整参数。下面,我们就来详细聊聊这两种模式。

01Analog模式

Analog模式,中文叫模拟模式,是一种连续测量光信号的方式,测量的是整体信号强度。它把PMT检测到的光信号转换成连续的电流或电压,然后输出为相对单位,比如RFU(相对荧光单位)或RLU(相对发光单位)。这就像用音量调节器测量声音大小:你听到的是整体音量,而不是每个音符的细节。

RFU(相对荧光单位):常用于荧光检测,比如ELISA实验。它表示样本发出的荧光强度,是一个相对值,没有绝对物理意义(比如,1000 RFU不一定比500 RFU亮一倍,因为仪器校准和实验条件会影响结果)。

RLU(相对发光单位):常用于化学发光检测,比如报告基因实验。它也是相对单位,反映发光反应的强度。

Analog模式测量快速、简单,适合中等到高强度的信号。比如,在检测高浓度蛋白或细胞活性时,Analog模式能快速给出结果,操作方便。但其对微弱信号不敏感,容易受背景噪声干扰。想象一下,在嘈杂的派对上,你想听清远处朋友的耳语——Analog模式可能就力不从心了。

举个例子

假设你在测量一杯果汁的甜度,Analog模式就像用甜度计直接读出一个数值(比如“50甜度单位”),它告诉你整体甜度,但不会去数里面有多少糖分子。

02Counts模式

Counts模式,中文叫计数模式,是一种离散测量方式,像“粒子计数器”,精准捕捉每个光子。它把光信号看成一个个独立的光子,PMT会“数出”在一定时间内检测到的光子数量,单位是counts(计数)或CPS(每秒计数)。这就像用粒子计数器统计雨滴:你记录的是每一滴雨,而不是整体雨量。

Counts(计数):表示在特定时间内检测到的光子总数。比如,1000 counts表示检测到了1000个光子.

CPS(每秒计数):表示每秒检测到的光子数,是counts的速率版本。例如,500 CPS意味着每秒有500个光子被捕获。

Counts模式的优点是超高灵敏度,能检测极微弱信号,抗噪声能力强。因为它只计数真实的光子事件,忽略背景干扰。缺点是测量速度较慢,适合低强度信号。如果信号太强,PMT可能“数不过来”,导致信号饱和。

举个例子

想象你在数夜空中的星星,Counts模式就像用望远镜一颗一颗地数星星,记录总数(比如“今晚看到1000颗星”)。这种方式更精确,尤其适合观察暗弱的星星。

因此,Analog模式是“快速调查员”,擅长处理信号比较强的样本(荧光,荧光偏振);Counts模式是“精细分析师”,专攻信号较弱的样本(化学发光,时间分辨荧光,Alpha)。这两种模式没有绝对优劣,只有适合与否。理解它们的原理,能帮助我们在科研和检测中更高效地获取可靠数据。

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