七夕之问：选个靠谱的“伴侣”？AO/PI又快又准零干扰！Cellometer Ascend助您做出最佳选择

在细胞治疗产品的开发过程中，细胞活力检测的准确性直接影响产品的放行质量与最终疗效。目前市场上常用的检测方法包括AO/PI与AO/DAPI等，然而AO/DAPI在模拟真实实验条件下（如低温/营养剥夺模型）表现不佳，误差可达10%–30%，严重影响结果的可靠性。《Journal of Fluorescence》上发表的一项研究明确指出：AO/PI染色法在稳定性、灵敏度及抗干扰性方面均显著优于AO/DAPI，更适用于细胞治疗领域中对细胞活力的精准检测。瑞孚迪（Revvity）率先实现AO/PI染色法的商业化应用，瑞孚迪推出全新一代细胞计数仪Cellometer Ascend，推动细胞质检进入高信度时代。

AO/PI的三大优势特性[1]

Part.01时间无关性：染色时长“零影响”

AO/DAPI的局限：在低温/营养剥夺（LT/ND）模型中，30分钟内死细胞活力读数从26%下降至11%，DAPI需更长时间渗透死细胞，稳定结果需等待超过30分钟。

AO/PI的优势：染色时间在0–40分钟内，细胞活力几乎无波动，加热致死（HK）与LT/ND死细胞活力均稳定在0%。

机制解析：PI与DNA双链结合无序列偏好性，而DAPI偏向结合AT富集区，因此PI标记更快、更全面，DAPI则需更长时间。

Part.02死细胞高灵敏度：正交验证逼近0%

即便在细胞凋亡/坏死导致DNA断裂的情况下，碎片化DNA无法被识别为完整细胞，AO/PI仍可准确区分细胞生死状态，为细胞治疗产品的开发与质控提供坚实数据基础。

·AO/PI在5天培养中始终保持~0%活力读数，准确判断细胞完全死亡。

·AO/DAPI持续高估细胞活力（HK模型约5%，LT/ND模型从20%缓慢下降），无法全面识别死细胞。

Part.03抗干扰性：FRET机制杜绝假阳性

AO/PI借助FRET机制实现快速、稳定、特异性的死细胞标记，不受染色时长干扰。相反，AO/DAPI染色缓慢且不完全，随时间推移不断产生假阳性信号（AO+/DAPI-），无法真实反映样本状态。

Cellometer Ascend：

更精准可靠高效

01明场和双荧光通道，适合多细胞类型

Cellometer Ascend具有明场、红/绿荧光两种通道，两种通道结合分析结果更加真实、准确。可分析多种细胞类型(包括原代细胞和细胞系)，可通过台盼蓝、AO/PI多种染色方法进行细胞活力、细胞直径检测，从而进一步评估细胞质量，确保用于治疗的细胞具有良好的活性。02基准点聚焦/基于图像的自动聚焦

以确保在不同样本条件下都能获得清晰的图像，基准点聚焦方式对于低浓度样品也可以准确快速检测，浓度低至2x104个细胞/mL的样本（CV<10%）；

369mm2超大成像面积

可捕获约为血球计数板4-17倍的采样面积，最大可达到69mm2，特别适用于低浓度的细胞样本细胞计数仪能够快速、准确地测定细胞浓度；

4细胞轮廓精准识别

基于细胞轮廓的专有识别算法，对于成团细胞也能准确分割。

优势方法+高效平台

=细胞治疗质检新范式

本研究通过模拟真实生产环境的低温/营养剥夺模型证实：AO/PI凭借其时间无关性、高死细胞灵敏度与优异抗干扰性，为细胞活力检测提供了更优解。Cellometer Ascend作为该方法的理想搭载平台，以全自动检测、高通量处理和精准算法，为细胞治疗企业提供从研发到生产放行的全周期质控支持。