PCY功能性筛选前沿—进军自免

在前期的推送中，我们分享了高内涵技术主导的Pharmacoscopy（PCY）Ex vivo筛选技术平台在血液瘤精准医疗的成功，和实体瘤、细胞治疗等重要领域的应用前沿。不出意外，开辟肿瘤之外的新战场成了PCY技术的重要突破点。在此，我们分享PCY技术以类风湿性关节炎（RA）为切入点，在自免领域功能性精准医疗的创新研究。相关的研究成果发表于柳叶刀旗下的eBioMedicine上。有意思的是，PCY技术在血液瘤的突破案例同样也发表于柳叶刀旗下的lancet haematology。

与直观的差异化肿瘤杀伤表型不同（下面第一个流程），RA的自免相关细胞表型会更为复杂。对此，研究进一步发挥细胞影像的内涵优势，靶向RA发病相关、临床易获得的PBMC细胞群体，结合临床RA药物和阳性对照化合物，构建PCY功能性筛选流程（下面第二个流程）。

在直接分析各种免疫细胞群体丰度（下图左）的基础上，研究进一步开发高内涵技术平台，量化细胞的形态（下图中）和相互作用表型（下图右）。

在上述的PCY技术路线上，我们就可以直观地检测ex vivo药物刺激对于PBMC不同细胞群体的表型影响（下图左），并进一步分析量化形态学（如下图中）和重要的细胞间相互作用表型（下图右）的变化。同时，研究也证明该技术路线还可支持活细胞体系，拓展了PCY技术的应用场景。

在此基础上，研究在ex vivo水平筛选和分析RA药物和免疫细胞表型的相关性。开展聚类研究的同时，研究挖掘和发现新的药物作用表型，如Etanercept对Monocyte的表型影响。与健康对照组相比，研究也进一步探究RA患者体内药物治疗（In vivo treatment）对PBMCs复杂表型的影响。

最后，回归到自免精准医疗的主题，研究利用PCY技术来区分健康对照组和不同发病程度的类风湿关节炎（RA）患者（下图左）和潜在生物标志物挖掘。有意思的是，PBMC群体中，T细胞对阳性刺激药物，而不是RA药物处理的形态学反应，有能效指示疾病的发生和程度（下图中、右）。这一发现很可能是自免情况下，持续的差异化细胞激活所致。

与之前的PCY筛选研究一致，Opera Phenix高内涵平台结合CellCarrier成像微孔板依然主导核心的PCY筛选流程。此外，JANUS移液工作站则参与了自动化免疫荧光染色工作。通过优化液体处理参数，JANUS液体处理工作站可用于复杂细胞模型细胞影像筛选中，如模型培养、药物处理和染色等多个流程的自动化工作（如下流程图）。自动化移液技术的引入可显著提高细胞影像筛选的可重复性和规模化能力，同时减少了人为操作导致的误差和对珍贵细胞模型的破坏风险。

JANUS移液工作站

Opera Phenix™ PLUS高内涵筛选系统