Trypelectase 胰蛋白酶（猪源）残留 ELISA 检测试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术，将抗胰蛋白酶的单克隆抗体包被在酶标板上，分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的胰蛋白酶会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗胰蛋白酶抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的胰蛋白酶发生特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物 TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的胰蛋白酶，则 HRP 会使无色 TMB 变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；最后，在λmax=450nm（OD=450nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的胰蛋白酶与 OD 成正比，通过四参数拟合软件绘制标准曲线便可计算出样本中胰蛋白酶的浓度。

产品特点

1.线性范围宽广

2.孔间差异小

3.使用操作简便

4.特异性强

注意事项：

1. 试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。

2. 试剂盒未使用时应保存在 2-8 ℃冰箱，已复溶但未用完的标准品，请丢弃。

3. 使用前请在室温恢复 30 min，且充分混匀试剂盒里的各种成份及制备的样品。

4. 在试验中标准品和样本作复孔检测，且加入试剂的顺序应保持一致。

5. 为避免交叉污染，请在试验中使用一次性实验吸头，封板膜及洁净塑料容器。

6. 浓缩生物素化抗体和浓缩酶结合物的体积较少，使用前请离心处理（

5-10 秒

即可），使管壁上的液体集中于管底。取用时，请使用移液器小心吹打几次。

7. 除了试剂盒中的浓缩洗涤液和终止液可以通用外，请不要使用其他来源试剂

盒内含的试剂代替本试剂盒中的某单个组分。

8. 为保证结果准确，每次检测均需做标准曲线。

9. 如果样本中的靶标物检测浓度高于标准品的最高值，请将样品做适当倍数稀

释后检测，建议正式实验前做预实验以确定稀释倍数。

安全提示：

试剂盒组成	规格（96T）	保存条件
Microwell Plate-antibody coated 酶标板	8 wells × 12 strips	2-8℃
Standard 标准品	3200 pg/ml	2-8℃
Standard/sample Diluent SR1 标准品/标本稀释液	30 mL/vial	2-8℃
Concentrated Biotin-Conjugated antibody 浓缩生物素化抗体	120 μL/vial (100×)	2-8℃
Biotin-Conjugated antibody Diluent SR2 生物素化抗体稀释液	14 mL/vial	2-8℃
Concentrated Streptavidin-HRP solution 浓缩酶结合物（避光）	120 μL/vial (100×)	2-8℃
Streptavidin-HRP Diluent SR3 酶结合物稀释液	14 mL/vial	2-8℃
Wash Buffer Concentrate 浓缩洗涤液（20×）	30 mL/vial (20×)	2-8℃
Substrate Solution 显色液	12 mL/vial	2-8℃
Stop Solution 终止液	10 mL/vial	2-8℃
封板胶纸	40 张	2-8℃
说明书	1 份	2-8℃

注：本品有效期为 12 个月

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Trypelectase 胰蛋白酶残留 ELISA 检测试剂盒

Trypelectase 胰蛋白酶（猪源）残留 ELISA 检测试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术，将抗胰蛋白酶的单克隆抗体包被在酶标板上，分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的胰蛋白酶会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗胰蛋白酶抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的胰蛋白酶发生特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物 TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的胰蛋白酶，则 HRP 会使无色 TMB 变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；最后，在λmax=450nm（OD=450nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的胰蛋白酶与 OD 成正比，通过四参数拟合软件绘制标准曲线便可计算出样本中胰蛋白酶的浓度。

产品信息

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Q&A

应用文献

Q: 标准曲线梯度差

A: (1) 吸液或加液不准：检查移液器和吸头

(2) 标准品稀释不正确：溶解标准品时稍微旋转瓶身，轻轻混匀使粉末完全溶解

(3) 酶标板洗涤不完全：保证洗涤时间和洗涤次数及每孔的加液量

Q: 显色很弱或无色

A: (1) 温育时间太短：保证充足的温育时间

(2) 实验温度不正确：使用推荐的实验温度

(3) 试剂体积不够或漏加：检查吸液及加液过程，保证所有试剂按顺序足量添加

Q: 读数数值低

A: 酶标仪设置不正确：在酶标仪上检查波长和滤光片装置；提前打开酶标仪预热

Q: 变异系数大

A: 加液不正确：检查加液情况

Q: 背景值高

A: (1) 检测抗体的工作浓度过高：使用推荐的稀释倍数

(2) 酶标板洗涤不完全：重新仔细阅读操作步骤，保证每步清洗完全;如果用自动洗板机，请检查所有的出口是否有堵塞;是否使用试剂盒配备的洗涤液。

(3) 洗液有污染：配制新鲜的洗液

Q: 灵敏度低

A: (1) ELISA试剂盒保存不当：按说明书要求保存相关试剂

(2) 读数前未终止：OD读数前应在每孔中加入终止液

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