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传统的细胞系开发需要好几个月的时间,周期长,主要受限于单细胞的分选效率低、成像设备有边缘效应、成像结果容易受到杂质干扰、ghost cell等问题。
Cytena公司推出的UP.SIGHT单克隆筛选系统是分选和成像一体机,2min即可分选一块96孔板,在分选的同时能进行3D全孔细胞成像,孔底成像功能监控细胞生长过程,完美解决上述问题,助力细胞系开发驶入“快车道”
自今年1月份发布,新老客户争相预约UP.SIGHT Demo实验,获得非常好的使用体验。现在和大家分享一波应用案例:
●孔板类型:384孔板,96孔板
●细胞:CHO-K1
1. 分选速度快速
一块96孔板只需2min!
2.单克隆细胞来源保证图片
1) 喷嘴成像
提供多张喷嘴图像,从源头上证实单细胞进入孔板
2) 3D全孔成像
UP.SIGHT在孔板托盘下方具有高清的相机,含有单细胞的液滴一滴进孔板的瞬间,底部的相机能自动聚焦,自下而上的层层扫描,覆盖整孔的体积,直到扫描界面与单细胞进行完美的“相遇”,记录单细胞进孔的证据。
3D全孔成像的优势:
●消除传统的细胞分选需要借助离心的方式加速细胞沉降,避免细胞被甩到孔的边缘,出现边缘效应,或者“ghost cell”等问题
● 消除细胞沉降到底部拍照时,来自于孔板本底不干净/杂质的干扰
3. 细胞生长监测
从Day0天起监测单细胞生长分裂,到第7天可看到明显的单细胞克隆团。
4.结论
根据统计,一块384孔板除去阳性对照孔,一共对378个孔进行了单细胞分选,对分选过程中的喷嘴成像、3D全孔成像以及后续的底板成像进行评估,喷嘴成像显示得到单细胞孔378个,即单细胞率100%;3D全孔成像显示得到的单细胞孔374个,即单细胞率98.9%;这也充分表明喷嘴成像和3D全孔成像可以相互佐证,使我们的单细胞率的正确率无限接近100%;生长7天后,330个孔成功生长成单细胞克隆团,单克隆率为88.2%。
今年二季度,Cytena将老机型c/f.sight分别升级到C.SIGHT 2.0 和F.SIGHT 2.0,并纳入UP.SIGHT家族,升级后的C.SIGHT 2.0 和F.SIGHT 2.0优势显著。
分析对象 | c.sight | C.SIGHT2.0 | 升级后的优势 |
外观 | 蓝色LED酷炫指示灯 | ||
聚焦 | 需要拆开外壳进行聚焦 | 外部有旋钮进行左右调整和聚焦 | 不需要开盖,可以通过外部旋钮直接聚焦,减少维护,更加方便 |
升级功能 | 不能升级 | 可以升级到UP.SIGHT | 2.0保留了升级的空间 |
分离效率 | 3-5分钟/96孔板 | 2-3分钟/96孔板,增加focus功能,分选更快! | 速度更快,效率更高! |
耗材 | 螺丝固定 | 磁力固定 | 升级后无需螺丝固定,磁力固定,操作更简便 |
孔板固定 | 卡夹固定 | 托盘 | 卡夹用久了容易松动,托盘则无此困恼 |
单细胞率 | 80-99% | 分选效率保持一致性 | |
细胞生长率 | 70-90% |
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